更新時(shí)間：2025-06-16
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試劑盒保溫：
① ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么 ELISA 反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。
② 溫育常采用的溫度有 43℃、37℃、室溫和 4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立 ELISA 方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在 37℃經(jīng) 1-2 小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)ding峰。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在 43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應(yīng) 4℃更為*，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜，以形成多的沉淀。但因所需時(shí)間太長，在中一般不予采用。
elisa試劑盒保存條件：
1 ) 未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意，收到試劑盒后請(qǐng)盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A、檢測(cè)溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2 ) 使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，小鼠血管內(nèi)皮生長因子ELISA檢測(cè)試劑盒開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。
注意事項(xiàng)：
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡
2. 洗滌進(jìn)程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性
3. 一次加樣時(shí)刻控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔
5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，小鼠血管內(nèi)皮生長因子ELISA檢測(cè)試劑盒請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，核算時(shí)請(qǐng)乘以稀釋倍數(shù)
6. 在制造標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液制造，不能混雜
7. 底物請(qǐng)避光保存
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑
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