更新時間：2025-06-08
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實(shí)驗(yàn)規(guī)則：
1、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配
2、檢測前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸
4、待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。
5、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定
6、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性
7、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證
ELISA試劑盒正確選擇合適的陰性對照：陰性對照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，好先行檢測確定其中不含待檢物質(zhì)，檢測成分有：酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B等。
人牛小腸堿性磷酸酶（CIAP）elisa試劑盒說明：
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）2-8℃（頻繁使用時）
2．有效期：6個月
3．濃洗滌液會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶
4．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響
5．中、英文說明書可能會有不一致之處， 請以英文說明書為準(zhǔn)。
科研試劑盒標(biāo)本的稀釋原則：首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。后計(jì)算濃度時，稀釋了“N"倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N"。
保質(zhì)前使用：
1．確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目，并增加1孔作為TMB空白顯色孔。總數(shù)=樣品數(shù)+9；做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。
2．將 2000pg/ml ,1000pg/ml ，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2pg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1ELISA試劑盒孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于人血清、體液、組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清，直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品100μι。
3．酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng)90分鐘。
4．反應(yīng)后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對著吸水紙拍幾下。不洗。
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